糖化血紅蛋白檢測是糖尿病診斷與長期血糖控制評估的標準，而基于離子交換層析原理的糖化血紅蛋柱管因其成本低、操作簡便，仍在基層醫療和資源有限地區廣泛應用。盡管看似操作簡單，但若使用不規范，易導致結果偏差、重復性差甚至誤診。掌握
糖化血紅蛋柱管科學、嚴謹的使用方法，是實現分離清晰、定量準確、結果可靠的關鍵。
一、使用前準備：三查三凈原則
查試劑有效期：確認柱管、溶血劑、洗脫液均在有效期內，無沉淀或變色；
查樣本狀態：全血樣本應EDTA抗凝，無溶血、脂血或凝塊，采集后7天內檢測；
查環境條件：室溫穩定（18–25℃），避免陽光直射或強氣流干擾層析過程。
二、規范操作流程
樣本預處理
取適量全血（通常25–50μL）加入溶血劑中，充分混勻，靜置5–10分鐘使紅細胞裂解；
混合液需澄清透明，若有絮狀物應離心（3000rpm,5min）取上清。
上樣與層析
輕輕顛倒柱管使填料均勻沉降，打開下端塞子讓緩沖液自然流出至填料表面；
用移液器緩慢將溶血液沿管壁加入柱中，切勿沖散填料層；
待樣本滲入填料后，加入第一種洗脫液（通常為低離子強度緩沖液），洗脫HbA0等非糖化組分；
再加入第二種洗脫液（高離子強度），洗脫HbA1c組分，收集對應洗脫液于比色管中。
比色測定
用分光光度計在指定波長（如415nm）測定各組分吸光度；
按公式計算：HbA1c%=（HbA1c吸光度/總血紅蛋白吸光度）×100%；
建議每批檢測包含質控樣本（正常/異常水平）以驗證準確性。
三、質量控制建議
每月參與室間質評（EQA），確保結果可比性；
建立室內質控圖，監控批內/批間變異系數（CV應＜5%）；
若結果與臨床不符（如HbA1c與指尖血糖差異過大），應復查或改用HPLC/免疫法確認。
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更新時間：2025-12-08 
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